液相色譜儀的應(yīng)注意的事項

液相色譜儀用水來源

1 專門的純水機或超純水機；
2 去離子水重蒸；
3 二次或三次重蒸水；
4 采用類似家用的純水機；
5 市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水；
6 其它途徑
以上的水除第1項的水能用于梯度淋洗外，其余的水均難用于梯度淋洗。不管采用何種途徑，配制流動相應(yīng)用新鮮水，水質(zhì)越高放置時間越短。
理想的HPLC用水應(yīng)為18.2MΩ的超純水，并通過0.22um的濾膜，除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。
zui小檢測限的計算方法

（以N2000色譜工作站為例）
CL=2*Nd*c*20/HV
注：Nd 基線噪聲，單位：mV
c 樣品濃度
H 峰高，單位：mV（或AU）
V 進樣體積
例：
如基線噪聲為20微伏即0.02mV，萘的甲醇標樣溶液濃度為0.0001g/L，峰高145000微伏即145mV，進樣體積為20微升，即得：
CL=2*0.02*0.0001*20/145*20=2.76e-8
即10的負8次方

對儀器進行維護時應(yīng)該遵循的幾條基本規(guī)則

1. 一次規(guī)則
當系統(tǒng)出了故障，你可以試探性地改變某些狀態(tài)，一次可以改變一個參數(shù)。例如，限制拖尾峰（tailing peak）。前者少見。>色譜峰脫維的問題，可以依次改變流動相，換保護柱，換分析柱等。做一些簡單的改變步驟，也許就能解決問題。
2. 二次比較規(guī)則
在動手檢修之前已經(jīng)明確了故障所在，或者已經(jīng)確定了解決故障的方案。換句話說，動手之前已經(jīng)找對了解決辦法。例如，在進樣過程中發(fā)現(xiàn)內(nèi)標物的峰值變低了，可以重復進樣看看重復性如何，如果是偶然變低，是否是定量管里進了氣泡。這個規(guī)則可用于考察系統(tǒng)改變后的情況。更換了流動向后在正式進樣前可以進兩次標準品以檢查保留時間的穩(wěn)定情況和色譜峰的穩(wěn)定性。在梯度洗脫中如果出現(xiàn)了多余的峰，可以空載梯度洗脫一次（真的有問題嗎？），用此規(guī)則可以避免不必要的改變，盡快確定糾正措施。
3. 取代規(guī)則
用好的部件換下可疑的部件，是查找故障的方法。如果你懷疑檢測器引起了噪音，就換一個性能好的檢測器。如果故障被排除了，就說明換下的檢測器有問題。這個規(guī)則應(yīng)用的規(guī)模有大有小，可以從換整個部件到換印刷線路板上的集成塊。
4. 換回規(guī)則
這個規(guī)則和取代規(guī)則一起運用，好部件取代了可疑部件后情況并未得到改善，應(yīng)重新?lián)Q上原部件。這樣做的維修費用zui小，也防止了用過的部件積壓下來。這條規(guī)則僅適用于單一的故障。換回原則不適用于以下的情況：
（1） 在取下時新部件已損壞（如泵密封墊圈）；
（2） 部件價格低（如柱內(nèi)襯過濾片）；
（3） 重新裝上原部件要冒損壞的風險；
（4） 定期更換的部件。
5. 參考條件規(guī)則
通常有兩種參考條件：①標準參考條件；②試驗參考條件。
標準參考條件也叫標準試驗條件，是從一個系統(tǒng)到另一個系統(tǒng)，從一個實驗室到另一個實驗室都易于驗證的條件。用該條件所測得的數(shù)據(jù)有助于識別實際試驗和系統(tǒng)間的問題。如果在某試驗條件下系統(tǒng)壓力升高，而在標準條件下壓力正常。這說明系統(tǒng)異常是由實驗室的變化所引起的。下表列舉了啟用新色譜柱是的標準試驗條件，在使用過程中也可用此標準試驗條件檢查系統(tǒng)的情況。
流動相 甲醇/水（體積比=70/30）
色譜柱 C18
反相 流速 1mL/min
檢測器 UV 254nm
樣品 尿嘧啶（用于t0）
苯酚，苯乙酮，硝基苯，苯甲醚，甲苯

流動相 正己烷/異丙醇（體積比=75/25）
色譜柱 腈基
極性鍵合相 流速 1mL/min
檢測器 UV 254nm
樣品 硝基苯，芐醇，2,4-二硝基甲苯，對硝基芐醇

流動相 正己烷/二氯甲烷/異丙醇胺（體積比=95/4/1）
色譜柱 硅膠
正相 流速 1mL/min
檢測器 UV 254nm
樣品 2-苯-2-丙醇，甲芐醇，肉桂醇
試驗參考條件是用于檢查正常系統(tǒng)每天的工作情況。要選zui方便的方法驗證這種條件。每天可以打印兩張校正用色譜圖作對照，檢查保留時間、峰寬、系統(tǒng)壓力等方面的變化。發(fā)現(xiàn)峰的斜率、色譜柱塔板數(shù)和其他參數(shù)與原來色譜圖相比有了變化，說明系統(tǒng)在運行中可能發(fā)生了問題。當然發(fā)生問題不結(jié)合實際分析程序考慮，只通過查找標準參考色譜圖是不能一目了然的。
6. 記錄規(guī)則
這條規(guī)則往往被人忽視。應(yīng)該在每次維護和故障排除后都作記錄。例如，對系統(tǒng)的某一特定故障因為沒作記錄就不可能系統(tǒng)地分析問題，費時又費力。從長遠掛點看，系統(tǒng)發(fā)生的特定故障對今后的操作也有極其重要的意義。每臺儀器都應(yīng)備有維修記錄本，內(nèi)容包括日期、故障部位、現(xiàn)象、產(chǎn)生的原因、解決的辦法和結(jié)果等。還有一點要注意，試過或換下的部件都要貼上標志。
做好維修保養(yǎng)記錄有如下好處：
（1） 讓所有的操作人員都知道發(fā)生了什么故障，在操作